🔬 Cell Passaging Calculator

P-Calc 마스터하기: 세포 계대, 더 이상 감으로 하지 마세요!

🔬 계산기의 원리: 정밀 계대의 과학

P-Calc (세포 계대 계산기)는 세포 배양의 핵심 과정인 계대(subculture/passaging)를 정량적이고 재현성 있게 수행할 수 있도록 돕는 도구입니다. 계산은 사용자가 선택한 두 가지 주요 방법, 'Split Ratio'와 'Seeding Density'를 기반으로 합니다.

• Split Ratio (분할 비율) 기반 계산: 이 방법은 현재 배양 용기에 있는 세포들을 특정 비율로 나누어 새로운 용기에 옮기는 방식입니다. 예를 들어 1:5 비율은 현재 세포의 1/5을 새 용기로 옮기는 것을 의미합니다. P-Calc는 현재 용기의 총 세포 현탁액 부피를 원하는 비율로 나누어, 새 용기에 첨가할 부피를 계산합니다.
• Seeding Density (세포 밀도) 기반 계산: 이 방법은 새로운 배양 용기의 단위 면적(cm²)당 특정 수의 세포를 심는 것을 목표로 합니다. P-Calc는 먼저 현재 용기의 총 세포 수를 Confluency(%)와 용기 표면적을 이용해 추정합니다. 그 후, 목표 용기의 표면적과 목표 시딩 밀도를 곱해 필요한 총 세포 수를 계산하고, 이를 기반으로 현재 세포 현탁액에서 가져와야 할 부피를 산출합니다.

📘 P-Calc 사용 가이드

1단계: 현재 배양 상태 입력
- Current Vessel: 현재 세포가 자라고 있는 배양 용기를 선택합니다.
- Current Confluency (%): 현미경으로 관찰한 세포의 밀집도(confluency)를 백분율로 입력합니다. (예: 80% confluency)
- Total Volume of Cell Suspension (mL): Trypsin 처리 후 세포를 수확하여 부유시킨 배지의 총 부피를 입력합니다.

2단계: 계대 방법 및 목표 설정
- Passaging Method: 'Split Ratio' 또는 'Seeding Density' 중 원하는 계대 방법을 선택합니다.
- (선택에 따라) Split Ratio 또는 Seeding Density 값 입력: 원하는 분할 비율이나 목표 세포 밀도를 입력합니다.
- New Vessel: 새로 세포를 옮겨 심을 배양 용기를 선택합니다.
- Number of New Vessels: 준비할 새 용기의 개수를 정합니다.
- Media Volume per New Vessel (mL): 새 용기에 채울 배지의 부피를 입력합니다.

3단계: 계산 및 프로토콜 확인
- 'Calculate' 버튼을 누르면, 각 새 용기에 추가해야 할 세포 현탁액의 부피와 총 필요한 배지의 양 등이 포함된 상세 프로토콜이 나타납니다.
- 'Save Card as Image' 기능을 사용하면, Cell Line 정보까지 포함된 깔끔한 '실험 프로토콜 카드'를 이미지로 저장할 수 있어 매우 편리합니다.

💡 주의사항 및 유용한 팁

- Confluency 추정의 정확성: Seeding Density 기반 계산 시, confluency 추정치는 결과에 큰 영향을 미칩니다. 일관된 판단 기준을 유지하고, 가능하다면 이미지 분석 소프트웨어를 활용하는 것도 좋은 방법입니다.
- Split Ratio의 한계: Split Ratio는 간편하지만, 세포 수가 아닌 부피를 기준으로 하므로 실험 간 편차가 발생할 수 있습니다. 실험의 재현성이 매우 중요한 경우, 세포 수를 직접 계수하여 Seeding Density를 조절하는 것이 더 정밀합니다.
- 세포 현탁액의 균질성: 계대 직전, 세포 현탁액을 파이펫팅으로 부드럽게 여러 번 섞어 세포가 균일하게 분포되도록 하는 것이 매우 중요합니다. 이는 각 용기에 동일한 수의 세포가 분주되도록 보장합니다.
- 프로토콜 카드 활용: 실험 날짜, Passage number, 사용한 Cell Line 등을 프로토콜 카드에 함께 기록하여 저장하면, 나중에 데이터를 추적하고 문제를 해결하는 데 큰 도움이 됩니다.