🌱 Cell Seeding Calculator

S-Calc 완전 정복: 세포 시딩, 이것만 알면 끝!

🔬 계산기의 원리: 정확성의 비밀

S-Calc (세포 시딩 계산기)는 연구자가 원하는 세포 밀도(cells/cm²)로 새로운 배양 용기에 세포를 분주(seeding)할 때 필요한 세포 현탁액(cell stock)의 양을 정확하게 계산해줍니다. 계산기는 다음의 핵심 원리를 기반으로 작동합니다:

• Stock 농도 계산: 혈구계산기(Hemocytometer)로 계수한 평균 세포 수와 희석 배율(Dilution Factor)을 이용하여 1mL당 세포 수를 계산합니다. (Stock 농도 = 평균 세포 수 × 희석 배율 × 10,000)
• 총 필요 세포 수 계산: 목표 용기(Vessel)의 표면적(cm²)과 목표 시딩 밀도(cells/cm²)를 곱하여, 하나의 용기를 준비하는 데 필요한 총 세포 수를 결정합니다.
• 필요한 Stock 부피 계산: 위에서 계산된 총 필요 세포 수를 Stock 농도로 나누어, 각 용기에 넣어야 할 세포 Stock의 부피(mL)를 계산합니다.

📘 S-Calc 사용 가이드

1단계: Stock 농도 입력
- Avg. Cells: 혈구계산기의 4개 사분면에서 계수한 총 세포 수를 입력합니다.
- DF / 10⁴ factor: 희석에 사용한 희석 배율(Dilution Factor)을 입력합니다. (예: 1:2 희석 시 2 입력)
- Stock 농도가 실시간으로 계산되어 표시됩니다.

2단계: 시딩 계획 수립
- Target Vessel: 세포를 시딩할 배양 용기(예: 6-well, 100mm dish)를 선택합니다.
- Number of Vessels: 준비할 용기의 개수를 입력합니다.
- Seeding Density (cells/cm²): 용기 표면적 1cm²당 시딩할 세포 수를 입력합니다. 이는 실험 목적과 세포 종류에 따라 달라집니다.
- Media Volume per Vessel (mL): 각 용기에 채울 총 배지 부피를 입력합니다.

3단계: 계산 및 결과 확인
- 'Calculate' 버튼을 누르면, 준비해야 할 총 부피, 필요한 총 세포 Stock 부피, 그리고 각 용기에 분주할 세포 Stock 및 배지의 양이 포함된 상세한 프로토콜이 생성됩니다.
- 'Save Protocol as Image' 버튼으로 프로토콜을 이미지로 저장하여 실험 노트에 첨부하거나 동료와 공유할 수 있습니다.

💡 주의사항 및 유용한 팁

- 정확한 세포 계수: 정확한 계산을 위해, 세포 계수 시 Trypan Blue 염색을 통해 살아있는 세포만 계수하는 것이 좋습니다. 세포가 뭉치지 않도록 잘 풀어주는 것도 중요합니다.
- 적절한 시딩 밀도: 너무 낮은 밀도는 세포 성장을 저해할 수 있고, 너무 높은 밀도는 과밀(over-confluence) 상태를 빠르게 유발하여 세포 상태에 영향을 줄 수 있습니다. 세포 종류에 맞는 최적의 시딩 밀도를 미리 파악해두세요.
- Vessel 가장자리 효과(Edge Effect) 방지: Multi-well plate 사용 시, 가장자리 well은 배지 증발이 더 빠를 수 있습니다. 이를 최소화하기 위해 플레이트 주변에 PBS나 증류수를 채운 다른 플레이트를 함께 두는 것이 도움이 될 수 있습니다.
- 프로토콜 저장: 'Save Protocol as Image' 기능을 적극 활용하여 실험 기록의 정확성과 재현성을 높이세요.